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羧酸酯酶主要位于肝、其他組織及細胞胞液、線粒體和內(nèi)質網(wǎng)。它是一種多聚蛋白,主要催化酯、硫酸酯和酰胺的水解。參與外源性化合物,如農(nóng)藥殘留等的代謝過程,通過水解的作用將這些有毒害的物質轉化為更容易排出體外的代謝產(chǎn)物。在脂質代謝過程中,羧酸酯酶能夠水解甘油三酯,磷脂等,生成脂肪酸和甘油,為細胞提供足夠的能量。在藥物代謝過程中,羧酸酯酶能夠提高藥物在組織中的轉運效率。它還參與了生物體內(nèi)的一些信號分子的代謝和調(diào)節(jié),比如調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)神經(jīng)信號的傳遞和突觸功能。羧酸酯酶的作用和肝臟的功能有直接的關系,它維持了生理穩(wěn)態(tài)和健康。
檢測樣品中羧酸酯酶活力的方法,一般生化法,或酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法。
生化法:羧酸酯酶催化乙酸-1-萘酯生成萘酚,進一步與固藍顯色劑反應生成有色物質,通過檢測該有色物質在450 nm處的光吸收增加速率,進而得出羧酸酯酶(CarE)活性大小。
酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法:雙抗體夾心法測定標本中的羧酸酯酶活性。通過純化的抗體包被微孔板,加入待測樣本,再與標記的抗體結合,通過顯色反應450 nm處測定吸光度,從而計算酶活性。
以上的兩種方法都是要采用標準曲線的方法,如果有必要的話,每個測定還需要2-3個重復,求取平均值,從而獲得相對有效,準確的結果?,F(xiàn)在,科研實驗方面,都有相對比較成熟的試劑盒。省去了繁瑣的試劑配制和存儲的條件,但對操作過程和注意事項卻是有要求的。看起來簡單了,其實更要認真的對待。